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第三节 脑脊液化学检验
一、蛋白质定性试验
【原理】
脑脊液中球蛋白( glubin，Glb)与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀，即潘氏( Pandy)试验阳性。
【试剂】
5%酚溶液:取纯酚25ml，加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1～2天，待完全溶解后，置棕色瓶内室温保存。
【操作】
取试剂2～3ml，置小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1～2滴，衬以黑背景，立即观察结果。
【结果判定】
阴性:清晰透明，不显雾状。
极弱阳性(±) :微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。
阳性: ( + )为灰白色云雾状; ( 2 + )为白色浑浊; ( 3 + )为白色浓絮状沉淀; ( 4 + )为白色凝块。
【临床意义】
正常时多为阴性。有脑组织和脑膜感染性疾患(如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、中枢神经系统梅毒、脊髓灰白质炎和流行性脑炎等)、蛛网膜下腔出血及蛛网膜下腔梗阻等时常呈阳性反应。脑出血时多呈强阳性反应，如外伤性血液混入脑脊液中，亦可呈阳性反应。
二、蛋白质定量测定
【原理】
磺基水杨酸为生物碱试剂，能沉淀蛋白质，对白蛋白沉淀能力比球蛋白强，加适量硫酸钠后，沉淀清、球蛋白的能力趋于一致，再与标准蛋白比较进行定量测定，即磺基水杨酸-硫酸钠比浊法。
【试剂】
磺基水杨酸-硫酸钠( SS-S)试剂:取磺基水杨酸3.0g和无水硫酸钠7.0g，加蒸馏水至100ml。过滤后，储存于棕色瓶中，如显色或混浊则不能用。
【操作】 1.制备标准曲线
含蛋白质200mg/L、400mg/ L、800mg/L、1200mg/L、1600mg/L的稀释混合人血清蛋白标准系列各0.5ml，加SS-S试剂4.5ml，充分混匀7～15分钟后，用420nm波长比浊，以吸光度为纵坐标，蛋白质为横坐标，绘制标准曲线。
2.样品检测
取待测脑脊液标本各0.5ml于两个试管中，其中一个试管加SS-S试剂4.5ml，另一个试管加154mmol/L的NaCl溶液4.5ml作为空白管。在与制作标准曲线相同的条件下比色，所测吸光度可从标准曲线上求得蛋白质浓度。
【参考区间】
腰椎穿刺: 0.2～0.4g/L;脑室穿刺: 0.05～0.15g/L;小脑延髓池穿刺: 0.10～0.25g/L (磺基水杨酸-硫酸钠比浊法)。
【临床意义】 1.中枢神经系统炎症
脑部感染时，脑膜和脉络丛毛细血管通透性增加，首先是白蛋白增高，随后是球蛋白和纤维蛋白增高。
2.神经根病变
如梗阻性脑积水、吉兰-巴雷综合征，多数患者有蛋白质增高，而细胞数正常或接近正常，即蛋白-细胞分离现象。
3.椎管内梗阻
脑与蛛网膜下腔互不相通，血浆蛋白由脊髓静脉渗出时，脑脊液蛋白质含量显著增高，有时高达30～50g/L，如脊髓肿瘤、转移癌、粘连性蛛网膜炎等。
4.其他
早产儿脑脊液蛋白含量可达2g/L，新生儿为0.8～1.0g/L，出生2个月后逐渐降至正常水平。
【注意事项】
1.脑脊液如呈混浊外观，应先离心取上清液检查。如蛋白质浓度过高，应先用生理盐水稀释后再测定。
2.加入SS-S试剂的方法、速度，室温和比浊前标本放置时间都会影响实验结果，故操作时应注意控制操作方法和比浊时间与标准曲线制作方法一致。应随气温改变，勤作标准曲线。
三、葡萄糖测定
【原理】
采用己糖激酶法，同血清葡萄糖测定。
【参考区间】
腰椎穿刺: 2.5～4.4mmol/L;脑室穿刺: 3.0～4.4mmol/L;小脑延髓池穿刺: 2.8～4.2mmol/L (己糖激酶法)。
【临床意义】
正常脑脊液内葡萄糖含量仅为血糖的50%～80%，早产儿及新生儿因血脑屏障通透性增高，葡萄糖含量比成人高，一般认为无病理意义。葡萄糖增高见于脑出血、影响到脑干的急性外伤、中毒及糖尿病等;降低见于急性化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、真菌性脑膜炎、脑肿瘤、神经性梅毒和低血糖等。
四、氯化物测定
【原理】
采用电极分析法，同血清氯化物测定。
【参考区间】
成人: 120～130mmol/L;儿童: 111～123mmol/L (电极分析法)。
【临床意义】
1.氯化物增高见于脱水、尿毒症、心力衰竭及浆液性脑膜炎等。
2.氯化物降低主要见于呕吐、细菌性脑膜炎、真菌性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肾上腺皮质功能减退、肾病变、脊髓灰质炎及脑肿瘤等。
五、酶类测定
【原理】
采用速率法，同血清相关酶类测定。
【参考区间】
乳酸脱氢酶( LDH)＜40U/L、天冬氨酸氨基转移酶( AST)＜20U/L、丙氨酸氨基转移酶( ALT)＜15U/L、肌酸激酶( CK) 0.5～2U/L、腺苷脱氨酶( ADA)＜8U/L (速率法)。
【临床意义】
LDH活性增高见于脑组织坏死、出血等。ALT、AST活性增高见于脑梗死、脑萎缩及急性颅脑损伤等。CK活性增高见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及多发性硬化等。ADA活性增高见于化脓性脑膜炎、脑出血及吉兰-巴雷综合征等。
六、免疫球蛋白测定
【原理】
采用免疫比浊法，同血清免疫球蛋白测定。
【参考区间】
IgG 10～40mg/L，IgA＜6mg/L，IgM＜0.22mg/L和IgE极少量(免疫比浊法)。
【临床意义】
IgG增高见于神经梅毒、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及病毒性脑膜炎等; IgA增高见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及病毒性脑膜炎等; IgM增高见于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤及多发性硬化等; IgE增高见于脑寄生虫病等。
七、蛋白质电泳
【原理】
常用醋酸纤维素薄膜电泳和琼脂糖凝胶电泳法，同血清蛋白质电泳测定。
【参考区间】
前清蛋白3%～6%，白蛋白50%～70%，α 1-球蛋白4%～6%，α 2-球蛋白4%～9%，β-球蛋白7%～13%和γ-球蛋白7%～8% (琼脂糖凝胶电泳法)。
【临床意义】
前清蛋白增高见于舞蹈症、帕金森病及脑积水等，减少见于中枢神经系统炎症;白蛋白增高见于脑血管病变，减少见于脑外伤急性期;α-球蛋白增高见于脑膜炎、脑肿瘤等;β-球蛋白增高见于退行性病变、外伤后偏瘫等;γ-球蛋白增高见于脑胶质瘤、多发性硬化等。