全国临床检验操作规程(第4版)
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第四节 红细胞沉降率测定

红细胞沉降率( erythrocyte sedimentation rate,ESR)是指红细胞在一定条件下沉降的速率。检测方法有:①魏氏( Westergren)检测法;②自动化沉降分析法;③全自动快速血沉分析仪法。血沉对某一疾病的诊断不具有特异性,但血沉对判断疾病处于静止期与活动期、病情稳定与复发、肿瘤良性与恶性具有鉴别意义,是临床广泛应用的检验指标。

一、检测方法

(一)魏氏检测法血沉测定 【原理】

魏氏检测法血沉测定是将枸橼酸钠抗凝血液置于特制刻度血沉管内,垂直立于室温1小时后,上层血浆高度的毫米数值即为红细胞沉降率。正常情况下,红细胞膜表面的唾液酸因带有负电荷,使红细胞相互排斥悬浮于血浆中而沉降缓慢,细胞间的距离约为25nm。当血浆成分或红细胞数量与形态发生变化时,可以影响排斥而改变红细胞沉降速度。影响血沉速度的因素主要有血浆因素和红细胞因素。①血浆因素:血浆中不对称的大分子物质如γ-球蛋白、纤维蛋白原、免疫复合物、胆固醇及甘油三酯等可使红细胞表面的负电荷减少,使红细胞发生缗钱状聚集,缗钱状聚集的红细胞与血浆接触总面积减小,下沉的阻力减小、重力相对增大导致红细胞沉降加快。血浆中白蛋白、卵磷脂则相反,对红细胞下沉有抑制作用,使血沉减慢。②红细胞因素:红细胞数量增多时,下沉时受到的阻力增大使血沉减慢。相反,红细胞数量减少时,红细胞总表面积减少血沉加快。红细胞形态变化对血沉的影响多为减慢。

【试剂与器材】 1.109mmol/L ( 32g/L)枸橼酸钠溶液

枸橼酸钠( Na 3C 6H 5O 7·2H 2O,分子量294.12) 3.2g;用蒸馏水溶解后,再用蒸馏水稀释至100ml,混匀。

2.血沉管

ICSH规定,血沉管为全长( 300± 1.5) mm两端相通,一端有规范的200mm刻度的魏氏管(玻璃制),管内径2.55mm或更大些,管内均匀误差小于5%,横轴与竖轴差<0.1mm,外径( 5.5± 0.5) mm,管壁刻度200mm,误差±0.35mm,最小分度值1mm,误差<0.2mm。

3.血沉架

应放置平稳,避免震动和阳光直射,保证血沉管直立90°±1°。

【操作】

1.取静脉血1.6ml,加入含109mmol/L枸橼酸钠溶液0.4ml于试管中,抗凝剂和血液比例是1∶4,混匀。
2.将混匀的抗凝血放入魏氏血沉管内,至“0”刻度处,将血沉管直立在血沉架上。
3.室温条件静置1小时。
4.读取红细胞上层血浆高度的毫米数。
5.报告方式:××mm/h。

【参考区间】

成年男性0~15mm/h;成年女性0~20mm/h。

【注意事项】

1.血沉管架应平稳放置,避免震动和阳光直射,保证血沉管直立90°±1°。
2.检测应在标本采集后3小时内测定完毕。存放时间超过3小时的样品,会出现假性增高。
3.抗凝剂与血液之比为1∶4,抗凝剂与血液比例要准确并立即混匀。抗凝剂应每周配制1次,置冰箱中保存,室温保存不超过2周。
4.目前全血细胞分析都采用EDTA钾盐抗凝血,为了减少抽血量,有用生理盐水或枸橼酸钠抗凝剂把EDTA抗凝血作1∶4稀释,立即采用魏氏血沉管检测,1小时后读取上层血浆毫米数的方法,这种检测方法与魏氏法有良好的相关性。
5.应注意血细胞比容对ESR的影响,CLSI参考方法严格要求调节Hct≤0.35,以消除Hct对ESR的影响。

(二)自动分析仪法血沉测定 【原理】

根据手工魏氏法检测原理设计,使用配套枸橼酸钠真空标本采集管,同时或分别对多个血液标本进行检测。通过红外线发射和接收装置自动测定管内初始液面高度,并开始计时的自动血沉仪:红外线不能穿过含大量红细胞的血液,只能穿过红细胞沉降后的血浆层,可用于检测到红细胞下降水平。仪器在单位时间内扫描红细胞高度,直至30分钟推算出每小时红细胞沉降数值。自动血沉仪的红外线定时扫描检测动态监测记录红细胞沉降全过程,显示检测结果并以提供红细胞沉降动态图形。
还有一种采用毛细管动态光学检测法的全自动快速血沉仪:在32r/min的速度自动混匀3分钟、温度为37℃、红外线测微光度计在波长621nm的条件下,仪器自动吸入毛细管内抗凝血200μl,在单位时间内将被检样本每20秒扫描1000次检测,通过光电二极管将光信号转变为与毛细管内红细胞浓度相关的电信号,得到的若干个电信号描绘成一个沉降曲线。红外线定时扫描检测可记录红细胞缗钱状结构的形成及沉降的变化过程,通过光密度的变化得到魏氏法相关的值。该方法学与魏氏法的相关系数=0.97。

【试剂与器材】

1.抗凝剂 109mmol/L枸橼酸钠溶液或EDTAK 2抗凝剂( 1.5mg/ml)。
2.试管 使用配套的真空标本采集管。
3.质控品和定标品。
4.仪器 自动血沉分析仪测定。

【操作】

1.采集血液标本到标本管规定刻度后与管内抗凝剂混匀,避免血液凝固。
2.将混匀后的标本管插入仪器内测定。
3.严格按照仪器说明书制定操作规程并进行操作。

【参考区间】

成年男性0~15mm/h;成年女性0~20mm/h。

【注意事项】

1.采集足够量的血液标本。
2.抗凝血标本应在室温条件下( 18~25℃),2小时内测定。在测定期内温度不可上下波动,稳定在±1℃之内。室温过高时血沉加快,可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢,无法校正。
3.存放时间超过3小时的样品,结果会有假性增加。
4.严格按照厂家说明书进行室内质控、定标及仪器操作。
5.应注意血细胞比容对ESR的影响,CLSI参考方法严格要求调节Hct≤0.35,以消除Hct对ESR的影响。

二、临床意义

1. ESR增快 ( 1)生理性血沉增快:

12岁以下的儿童或60岁以上的高龄者、妇女月经期、妊娠3个月以上ESR可加快,其增快的原因与生理性贫血及纤维蛋白原含量增加有关。

( 2)病理性血沉增快

1)炎症性疾病:急性炎症由于血中急性期反应物质迅速增多使血沉增快,慢性炎症如结核或风湿病时,血沉可用于观察病情变化和疗效。血沉加速,表示病情复发和活跃;当病情好转或静止时,血沉也逐渐恢复正常。
2)组织损伤和坏死:较大的组织损伤、手术创伤可导致血沉增快,如无合并症多于2~3周内恢复正常。血沉可用于鉴别功能性病变与器质性疾病,如急性心肌梗死时ESR增快,而心绞痛则ESR正常。
3)恶性肿瘤:用于鉴别良、恶性肿瘤,如胃良性溃疡ESR多正常、恶性溃疡ESR增快。恶性肿瘤治疗明显有效时,ESR渐趋正常,复发或转移时可增快。
4)高球蛋白血症:如多发性骨髓瘤、肝硬化、巨球蛋白血症、系统性红斑狼疮、慢性肾炎时,血浆中出现大量异常球蛋白,血沉显著加快。
5)贫血:血红蛋白低于90g/L时,血沉加快。

2. ESR减慢

临床意义不大,见于红细胞增多症、球形细胞增多症、纤维蛋白原缺乏等。